| ความเข้มข้นเริ่มต้น (g/L) |
|---|
| ความเข้มข้นโดยประมาณ (mM) |
|---|
| หมายเหตุ |
|---|
| MgSO₄ | M9/M63 minimal media เพิ่ม MgSO₄ 1 mM; สูตร M63 ระบุการเติม MgSO₄ | MgSO₄ anhydrous ≈ 0.12 g/L; MgSO₄·7H₂O ≈ 0.25 g/L | ≈ 1 mM | ค่าเริ่มต้นทั่วไป ≈ 1 mM; สูตร semi-defined high-density shake-flask ใช้ MgSO₄ 0.24 g/L |
| MgSO₄ | อาหาร semi-defined สำหรับ E. coli DH5α ความหนาแน่นสูง | 0.24 g/L | ≈ 0.97 mM (ถ้าคำนวณเป็น MgSO₄·7H₂O); ≈ 2.0 mM (ถ้าคำนวณเป็น anhydrous) | 文献ไม่ได้ระบุ hydration state อย่างชัดเจน ค่า mM จึงต้องปรับตามรูปแบบของสารเคมีที่ใช้ |
| (NH₄)₂SO₄ | M63 minimal medium | 2.0 g/L; สูตรเข้มข้น 5× มี 10 g/L เจือจางเป็น 1× ได้ 2 g/L | ≈ 15.1 mM (NH₄)₂SO₄; ≈ 30.3 mM NH₄⁺ | ตัวอย่างอาหาร minimal medium ที่ใช้ (NH₄)₂SO₄ |
| NH₄Cl | M9 minimal medium | 1.0 g/L; สูตรเข้มข้น 5× มี 5 g/L เจือจางเป็น 1× ได้ 1 g/L | ≈ 18.7 mM NH₄Cl / NH₄⁺ | ตัวอย่างอาหาร minimal medium ที่ใช้ NH₄Cl |
| NH₄Cl | อาหาร semi-defined สำหรับ E. coli ความหนาแน่นสูง | 1.5 g/L | ≈ 28.0 mM | สูตรนี้ประกอบด้วยกลูโคส ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ NaCl MgSO₄ NH₄Cl และ yeast extract |
| วิตามิน: thiamine-HCl | หมายเหตุการประยุกต์ใช้ E. coli high-density fed-batch มี stock solution thiamine-HCl 5 g/L แต่文献ที่สืบค้น ไม่ระบุความเข้มข้นสุดท้าย | หลักฐานไม่เพียงพอ | หลักฐานไม่เพียงพอ | อาหาร defined medium สำหรับ E. coli มักเติม thiamine แต่ข้อมูลที่สืบค้นมาไม่เพียงพอต่อการยืนยันความเข้มข้นสุดท้าย |
| วิตามิน: yeast extract (เป็นแหล่งวิตามิน/ growth factor รวม) | สูตร semi-defined สำหรับความหนาแน่นสูง | 12 g/L yeast extract | ไม่สามารถคำนวณเป็น mM ได้ | yeast extract เป็นสารประกอบเชิงซ้อน ไม่สามารถแปลงเป็นความเข้มข้น molar ของวิตามินเดี่ยวๆ ได้ |
ข้อสังเกตสำคัญและแนวทางปฏิบัติ:
การเลือกใช้แหล่งไนโตรเจน: อาหารประเภท M9 ใช้ NH₄Cl ในขณะที่อาหารประเภท M63 ใช้ (NH₄)₂SO₄ สูตรทั้งสองนี้เป็นทางเลือกแทนกัน ไม่ใช่การใช้รวมกันเป็นชุดมาตรฐาน
กลยุทธ์การหมักแบบความหนาแน่นเซลล์สูง (High-Cell-Density Fed-Batch): สำหรับกระบวนการ fed-batch ความเข้มข้นของไนโตรเจนในอาหาร batch เริ่มต้นไม่จำเป็นต้องสูงมาก เนื่องจาก在高密度发酵中 กลยุทธ์มาตรฐานคือการควบคุมการเจริญเติบโตผ่านการป้อนสารอาหาร (fed-batch) โดยมีคาร์บอนเป็นปัจจัยจำกัด ไม่ใช่การพึ่งพาอาหาร batch เพียงอย่างเดียว
ช่วงเริ่มต้นที่แนะนำในทางปฏิบัติ:
| ความเข้มข้นเริ่มต้น (g/L) |
|---|
| ความเข้มข้นโดยประมาณ (mM) |
|---|
| หมายเหตุ |
|---|
| MgSO₄ | M9/M63 minimal media เพิ่ม MgSO₄ 1 mM; สูตร M63 ระบุการเติม MgSO₄ | MgSO₄ anhydrous ≈ 0.12 g/L; MgSO₄·7H₂O ≈ 0.25 g/L | ≈ 1 mM | ค่าเริ่มต้นทั่วไป ≈ 1 mM; สูตร semi-defined high-density shake-flask ใช้ MgSO₄ 0.24 g/L |
| MgSO₄ | อาหาร semi-defined สำหรับ E. coli DH5α ความหนาแน่นสูง | 0.24 g/L | ≈ 0.97 mM (ถ้าคำนวณเป็น MgSO₄·7H₂O); ≈ 2.0 mM (ถ้าคำนวณเป็น anhydrous) | 文献ไม่ได้ระบุ hydration state อย่างชัดเจน ค่า mM จึงต้องปรับตามรูปแบบของสารเคมีที่ใช้ |
| (NH₄)₂SO₄ | M63 minimal medium | 2.0 g/L; สูตรเข้มข้น 5× มี 10 g/L เจือจางเป็น 1× ได้ 2 g/L | ≈ 15.1 mM (NH₄)₂SO₄; ≈ 30.3 mM NH₄⁺ | ตัวอย่างอาหาร minimal medium ที่ใช้ (NH₄)₂SO₄ |
| NH₄Cl | M9 minimal medium | 1.0 g/L; สูตรเข้มข้น 5× มี 5 g/L เจือจางเป็น 1× ได้ 1 g/L | ≈ 18.7 mM NH₄Cl / NH₄⁺ | ตัวอย่างอาหาร minimal medium ที่ใช้ NH₄Cl |
| NH₄Cl | อาหาร semi-defined สำหรับ E. coli ความหนาแน่นสูง | 1.5 g/L | ≈ 28.0 mM | สูตรนี้ประกอบด้วยกลูโคส ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ NaCl MgSO₄ NH₄Cl และ yeast extract |
| วิตามิน: thiamine-HCl | หมายเหตุการประยุกต์ใช้ E. coli high-density fed-batch มี stock solution thiamine-HCl 5 g/L แต่文献ที่สืบค้น ไม่ระบุความเข้มข้นสุดท้าย | หลักฐานไม่เพียงพอ | หลักฐานไม่เพียงพอ | อาหาร defined medium สำหรับ E. coli มักเติม thiamine แต่ข้อมูลที่สืบค้นมาไม่เพียงพอต่อการยืนยันความเข้มข้นสุดท้าย |
| วิตามิน: yeast extract (เป็นแหล่งวิตามิน/ growth factor รวม) | สูตร semi-defined สำหรับความหนาแน่นสูง | 12 g/L yeast extract | ไม่สามารถคำนวณเป็น mM ได้ | yeast extract เป็นสารประกอบเชิงซ้อน ไม่สามารถแปลงเป็นความเข้มข้น molar ของวิตามินเดี่ยวๆ ได้ |
ข้อสังเกตสำคัญและแนวทางปฏิบัติ:
การเลือกใช้แหล่งไนโตรเจน: อาหารประเภท M9 ใช้ NH₄Cl ในขณะที่อาหารประเภท M63 ใช้ (NH₄)₂SO₄ สูตรทั้งสองนี้เป็นทางเลือกแทนกัน ไม่ใช่การใช้รวมกันเป็นชุดมาตรฐาน
กลยุทธ์การหมักแบบความหนาแน่นเซลล์สูง (High-Cell-Density Fed-Batch): สำหรับกระบวนการ fed-batch ความเข้มข้นของไนโตรเจนในอาหาร batch เริ่มต้นไม่จำเป็นต้องสูงมาก เนื่องจาก在高密度发酵中 กลยุทธ์มาตรฐานคือการควบคุมการเจริญเติบโตผ่านการป้อนสารอาหาร (fed-batch) โดยมีคาร์บอนเป็นปัจจัยจำกัด ไม่ใช่การพึ่งพาอาหาร batch เพียงอย่างเดียว
ช่วงเริ่มต้นที่แนะนำในทางปฏิบัติ: