อิสราเอลเปิดฉากการโจมตีเป็นเวลา 12 วันในเดือนมิถุนายน 2025 โดยกำหนดเป้าหมายไปที่โรงเสริมสมรรถนะที่เมืองนาตันซ์ (Natanz), ฟอร์โดว์ (Fordow) และอิสฟาฮาน (Esfahan/Isfahan) สหรัฐอเมริกาตามมาด้วยปฏิบัติการ 'ค้อนเที่ยงคืน' (Operation Midnight Hammer) โดยโจมตีโรงงานทั้งสามแห่งนี้เช่นกัน ซึ่งรองประธานาธิบดีเจ.ดี. แวนซ์ (J.D. Vance) บรรยายว่าเป็นการโจมตีที่ "จำกัดวงแคบมาก" เพื่อทำลายโครงการอาวุธนิวเคลียร์ของอิหร่าน การโจมตีทำให้โรงงานแปลงสภาพและเสริมสมรรถนะยูเรเนียมได้รับความเสียหายอย่างหนัก ส่งผลให้การผลิตวัสดุเสริมสมรรถนะสูงหยุดชะงักไปชั่วคราว
กำลังการผลิตเครื่องปั่นเหวี่ยง (centrifuge) ของอิหร่านลดลงอย่างมากในช่วงแรก แต่เมื่อถึงเดือนกุมภาพันธ์ 2026 อิหร่านสามารถฟื้นฟูกำลังการผลิตได้ประมาณ 40% ของก่อนการโจมตี ตามการประเมินของหน่วยข่าวกรอง เครื่องปั่นเหวี่ยงส่วนใหญ่ที่ยังทำงานได้อยู่ที่ฟอร์โดว์ และอย่างน้อยหนึ่งแห่งที่ไม่เคยเปิดเผยมาก่อน ซึ่งปรากฏในภาพถ่ายดาวเทียม
ณ วันที่ 13 มิถุนายน 2025 — หนึ่งวันก่อนการโจมตีครั้งแรกของอิสราเอล — IAEA ประเมินว่าสต็อกยูเรเนียมเสริมสมรรถนะทั้งหมดของอิหร่านในรูปของยูเรเนียมเฮกซะฟลูออไรด์ (UF6) อยู่ที่ 9,040.5 กก. ซึ่งรวมถึง:
ยูเรเนียมระดับ 60% ปริมาณ 440.9 กก. นี้ หากนำมาเสริมสมรรถนะต่อจนถึงระดับเกรดอาวุธที่ 90% จะเพียงพอต่อการผลิต อาวุธนิวเคลียร์ประมาณ 10 ลูก วัสดุเสริมสมรรถนะสูงนี้เกือบทั้งหมดอยู่ในรูปแก๊ส (UF6) และถูกเก็บไว้ในถังขนาดเล็ก
หลังการโจมตี IAEA ไม่สามารถระบุปริมาณ ตำแหน่ง หรือองค์ประกอบปัจจุบันของสต็อกยูเรเนียมเสริมสมรรถนะของอิหร่านได้ อิหร่านไม่ได้รายงานว่าวัสดุจำนวนเท่าใดที่รอดพ้นจากการทิ้งระเบิด หรือถูกเก็บไว้ที่ไหน หน่วยงานระบุเพียงว่า "ไม่สามารถให้ข้อมูลใด ๆ" เกี่ยวกับสถานะของสต็อกได้
ราฟาเอล กรอสซี (Rafael Grossi) ผู้อำนวยการใหญ่ IAEA ประเมินว่ายูเรเนียมเสริมสมรรถนะ 60% ส่วนใหญ่ยังคงอยู่ที่ อุโมงค์คอมเพล็กซ์อิสฟาฮาน โดยไม่มีหลักฐานว่าถูกย้ายไปที่อื่น อุโมงค์คอมเพล็กซ์แห่งนี้ดูเหมือนจะเป็นเป้าหมายเดียวที่ไม่ได้รับความเสียหายรุนแรงจากการโจมตีในเดือนมิถุนายน 2025 กรอสซีกล่าวในเดือนมีนาคม 2026 ว่า "สิ่งที่เราเชื่อคือ อิสฟาฮานมีวัสดุระดับ 60% มากกว่า 200 กิโลกรัมเล็กน้อยจนถึงการตรวจสอบครั้งล่าสุดของเรา" ซึ่งหมายความว่าประมาณครึ่งหนึ่งของสต็อกก่อนการโจมตียังคงอยู่ที่นั่น อย่างไรก็ตาม ปริมาณและสภาพที่แน่นอนของวัสดุนั้นยังคงไม่สามารถยืนยันได้
รายงานของ IAEA ในเดือนกุมภาพันธ์ 2026 ระบุว่ายูเรเนียมเกรดใกล้กับอาวุธ "ปริมาณมาก" — รวมถึงวัสดุที่เก็บไว้ใต้ดินที่อิสฟาฮาน — ยังคงไม่สามารถระบุตำแหน่งได้ สถาบันวิทยาศาสตร์และความมั่นคงระหว่างประเทศ (ISIS) รายงานว่ายูเรเนียมเสริมสมรรถนะ 60% ของอิหร่านมากกว่าสองในสามจากทั้งหมด 440 กก. น่าจะถูกเก็บไว้ที่อิสฟาฮาน
IAEA ไม่ได้รับอนุญาตให้เข้าถึง โรงงานนิวเคลียร์ที่ถูกโจมตีไม่ว่าแห่งใดเลย — นาตันซ์, ฟอร์โดว์ หรืออิสฟาฮาน — นับตั้งแต่การโจมตีในเดือนมิถุนายน 2025 สามารถตรวจสอบได้เฉพาะไซต์ที่ไม่ได้ถูกกำหนดเป้าหมายเท่านั้น ตั้งแต่เดือนกุมภาพันธ์ 2026 เป็นต้นมา หลังจากสงครามเต็มรูปแบบปะทุขึ้น IAEA ก็สูญเสียแม้กระทั่งการปรากฏตัวทางกายภาพอันจำกัดนั้น ผลลัพธ์ดังที่สถาบันวิทยาศาสตร์และความมั่นคงระหว่างประเทศ (ISIS) บรรยายไว้ว่าเป็นการ "สูญเสียการตรวจสอบอย่างต่อเนื่องเกือบทั้งหมด" ของโรงงานนิวเคลียร์อิหร่าน
ในเดือนมิถุนายน 2026 คณะผู้ว่าการ IAEA ผ่านญัตติที่สหรัฐฯ หนุนหลัง เรียกร้องให้อิหร่านเปิดเผยสต็อกที่เหลืออยู่และอนุญาตให้มีการตรวจสอบ อิหร่านขัดขืน โดยยืนยันว่าการเข้าถึงจะเกิดขึ้นได้ก็ต่อเมื่อมีข้อตกลงนิวเคลียร์ขั้นสุดท้ายเท่านั้น ข้อตกลงสันติภาพชั่วคราวระหว่างสหรัฐฯ และอิหร่านที่ลงนามในเดือนมิถุนายน 2026 เปิดทางให้มีการตรวจสอบ แต่ต่อมาเตหะรานระบุว่าการเข้าถึงไซต์สำคัญยังคงขึ้นอยู่กับข้อตกลงขั้นสุดท้ายและการยกเลิกมาตรการคว่ำบาตร
ก่อนการโจมตี อิหร่านสามารถผลิตยูเรเนียมเกรดอาวุธ (90% U-235) เพียงพอสำหรับระเบิดนิวเคลียร์ 1 ลูกได้ภายในเวลาเพียง หนึ่งสัปดาห์ จากสต็อกยูเรเนียม 60% ที่มีอยู่
หลังการโจมตีในเดือนมิถุนายน 2025 หน่วยข่าวกรองสหรัฐฯ ประเมินว่าระยะเวลาที่อิหร่านต้องใช้ในการผลิตอาวุธนิวเคลียร์ถูกยืดออกไปเป็น สูงสุดหนึ่งปี
อย่างไรก็ตาม ภายในเดือนพฤษภาคม 2026 การประเมินของหน่วยข่าวกรองสหรัฐฯ แสดงให้เห็นว่ากรอบเวลา 'breakout' ไม่ได้เปลี่ยนแปลงไปเลย นับตั้งแต่ฤดูร้อนปีก่อนหน้า — หมายความว่าการสู้รบหลายเดือนที่เพิ่มขึ้นมาไม่ได้ทำให้ขีดความสามารถของอิหร่านลดลงไปอีก
ด้วยยูเรเนียมเสริมสมรรถนะ 60% ที่เชื่อว่ายังคงสภาพดีอยู่ประมาณ 200 กก. และอิหร่านได้ฟื้นฟูกำลังการผลิตเครื่องปั่นเหวี่ยงมาแล้วประมาณ 40% ผู้เชี่ยวชาญประเมินว่าอิหร่านสามารถเสริมสมรรถนะยูเรเนียมถึงระดับเกรดอาวุธ 90% ได้ภายใน ไม่กี่สัปดาห์หรือไม่กี่วัน หากตัดสินใจทำ การวิเคราะห์ที่ครอบคลุมหนึ่งชิ้นประเมินว่าใช้เวลา 2–4 สัปดาห์ ในการผลิตวัสดุเกรดอาวุธจากสต็อกที่รอดชีวิต และใช้เวลา 6–18 เดือน ในการพัฒนาจนเป็นหัวรบที่สามารถใช้งานได้
เพื่อให้เห็นภาพ การเปลี่ยนจาก 60% เป็น 90% ต้องใช้หน่วยงานแยก (SWU) ประมาณ 500 หน่วยต่ออาวุธหนึ่งชิ้น เทียบกับประมาณ 5,000 SWU ในการเปลี่ยนจากยูเรเนียมธรรมชาติเป็น 60% ซึ่งหมายความว่าเส้นทางที่สั้นที่สุดในการสร้างระเบิดคือการใช้สต็อก 60% ที่มีอยู่ แทนที่จะเริ่มต้นจากศูนย์
เนื่องจาก IAEA ไม่สามารถยืนยันขนาดสต็อกปัจจุบัน สถานะของเครื่องปั่นเหวี่ยง หรือการมีอยู่ของโรงงานที่ไม่ได้แจ้งให้ทราบ การประเมิน 'breakout' ทั้งหมดจึงมีความไม่แน่นอนสูง หน่วยงานเตือนว่า "ไม่สามารถปฏิบัติหน้าที่รับผิดชอบด้านการป้องกัน (safeguards) ได้" ภายใต้สนธิสัญญาไม่แพร่ขยายอาวุธนิวเคลียร์