To genredigeringer som gir CAR-T-celler superkrefter mot solide svulster

GNAS-knockout: Opprettholder kreftbekjempende aktivitet

Når T-cellene først er inne i svulsten, møter de et fiendtlig mikromiljø fylt med suppressive signaler. GNAS (som koder for Gαs-proteinet) fungerer som et sentralt signalnav som behandler flere suppressive signaler fra tumormikromiljøet. Ved å slette GNAS blir T-cellene i stor grad ufølsomme for disse signalene, slik at de kan opprettholde høy produksjon av interferon-gamma (IFN-γ), et nøkkelmolekyl i bekjempelsen av svulster . Dette gjør T-cellene motstandsdyktige mot de immunsuppressive forholdene som vanligvis lammer immunfunksjonen inne i solide svulster.

Synergistisk kombinasjon: Infiltrasjon og aktivitet

Å fjerne både P2RY8 og GNAS sammen gir en synergistisk fordel: T-cellene både trenger inn i svulsten i større antall og forblir svært aktive når de først er inne. I en lungekreftmodell i mus, selv ved en svært lav CAR-T-celledose, var to tredjedeler av musene tumorfrie ved studiens slutt, mens ingen av musene som fikk kontrollredigerte CAR-T-celler ble kvitt svulstene sine .

Bredde på tvers av solide svulstmodeller

Fordelene med disse redigeringene strekker seg utover lungekreft. CAR-T-celler som manglet GNAS alene, krympet svulster i flere solide svulstmodeller, inkludert melanom, lungekreft, bukspyttkjertelkreft, gastroøsofagealt adenokarsinom og uterint sarkom . Kombinasjonsredigeringene fungerte også når de ble testet i T-celler fra pasienter med eggstokkreft og melanom, noe som bekrefter overførbarhet til pasientavledede celler .

Ingen langsiktige bivirkninger ble observert hos mus som ble fulgt i mer enn seks måneder etter at svulstene var fjernet, noe som tyder på en gunstig sikkerhetsprofil .

En ny plattform for oppdagelse

Identifikasjonen av P2RY8 og GNAS ble muliggjort av en ny in vivo CRISPR-screeningsplattform utviklet av samme team. Denne plattformen tillater genomomfattende tap-av-funksjon-screeninger i primære menneskelige T-celler inne i tumorbærende mus, og overvinner tidligere begrensninger som holdt CRISPR-screeninger til in vitro-miljøer eller krevde store antall dyr . Systemet innebærer overekspresjon av et CD3 scFv på tumorceller for å oppnå høy gjenvinning av tumorinfiltrerende T-celler, noe som muliggjør omfattende analyse med et relativt lite antall dyr .

Implikasjoner for kreftimmunterapi

Disse funnene representerer et betydelig skritt mot å gjøre CAR-T-celleterapi effektiv mot solide svulster, som utgjør de aller fleste krefttilfeller. Den doble redigeringsstrategien adresserer to av de mest kritiske barrierene for solid svulst-immunterapi: dårlig T-celleinfiltrasjon og det immunsuppressive tumormikromiljøet. Den gunstige sikkerhetsprofilen observert i langsiktige musestudier støtter også videre utvikling mot klinisk testing .