Julat Kepekatan Optimum Bahan dalam Medium Kultur Utama untuk Fermentasi E. coli Ketumpatan Sel Tinggi

Mengenai Ammonium Sulfat vs. Ammonium Klorida:

• Medium jenis M9 menggunakan NH₄Cl, manakala medium jenis M63 menggunakan (NH₄)₂SO₄. Kedua-dua formula ini adalah reka bentuk alternatif, bukan kombinasi standard bersama .
• Dalam praktiknya, pilihan antara ammonium sulfat dan ammonium klorida bergantung kepada keperluan spesifik proses. Kedua-duanya berfungsi dengan baik sebagai sumber nitrogen bukan organik, dan tidak perlu ada bersama dalam medium permulaan.

Implikasi untuk Fermentasi Ketumpatan Sel Tinggi Fed-Batch:

• Jika matlamat anda adalah fed-batch ketumpatan sel tinggi, kepekatan sumber nitrogen dalam medium batch permulaan tidak semestinya tinggi. Proses ketumpatan tinggi biasanya bergantung pada strategi fed-batch untuk mengawal sumber karbon/nitrogen dan pH .
• Strategi standard untuk E. coli ketumpatan tinggi adalah fed-batch, dan bukannya hanya bergantung pada medium batch awal untuk mencapai OD tinggi .
• Cadangan praktikal untuk julat permulaan: MgSO₄ ~1–2 mM; NH₄Cl ~19–28 mM; atau (NH₄)₂SO₄ ~15 mM. Untuk vitamin, jika menggunakan sumber kompleks, ekstrak yis 5–12 g/L adalah sesuai; jika medium defined, thiamine-HCl memerlukan pengoptimuman khusus (DOE) kerana bukti sedia ada tidak mencukupi .

Sumber Rujukan Utama:

• PMC2526063 - High cell density media for Escherichia coli
• PMC6819147 - Recipes and tools for culture of Escherichia coli
• PeerJ Preprints 1406 - Formulation of a semi-defined medium for high cell density cultivation of E. coli in shake flasks
• Eppendorf Application Note - High-Density Escherichia coli Fed-batch Fermentation